• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Cell Direct RT qPCR komplekts — Taqman Direct Cell Lysis Cell Ready vienpakāpes qRT-PCR komplektu zonde

Komplekta apraksts:

Kat.Nr.DRT-01021/01022

Šūnu tiešai RT-qPCR, izmantojot ≤ 1000 000 šūnas,

un veicot RT qPCR tieši no šūnām bez iepriekšējas RNS attīrīšanas.

Šūnas tiek tieši lizētas, lai atbrīvotu RNS RT-qPCR;augstās tolerances sistēmas dēļ nav nepieciešams attīrīt RNS un tieši izmantot šūnu lizātus kā RNS veidnes RT reakcijām.Ātri un ērti;augsta jutība, spēcīga specifika un laba stabilitāte.

◮Vienkārši un efektīvi: ar Cell Direct RT tehnoloģiju RNS paraugus var iegūt tikai 7 minūtēs.

Izlases pieprasījums ir mazs, var pārbaudīt pat 10 šūnas.

◮ Augsta caurlaidspēja: tas var ātri noteikt RNS šūnās, kas kultivētas 384, 96, 24, 12, 6 iedobju plāksnēs.

DNS Eraser var ātri noņemt atbrīvotos genomus, ievērojami samazināt ietekmi uz turpmākajiem eksperimenta rezultātiem.

Optimizētā RT un qPCR sistēma padara divpakāpju RT-PCR reverso transkripciju efektīvāku un PCR specifiskāku un izturīgāku pret RT-qPCR reakcijas inhibitoriem.


  • :
  • Produkta informācija

    Produktu etiķetes

    FAQ

    Lejupielādēt resursus

    Apraksti

    Šis produkts izmanto unikālu līzes bufera sistēmu, lai ātri atbrīvotu RNS no kultivētiem šūnu paraugiem RT-qPCR reakcijām, novēršot laikietilpīgo un darbietilpīgo RNS attīrīšanas procesu, un tikai 7 minūtes, lai iegūtu nepieciešamo RNS veidni, ar 5 × Direct RT Mix, 2 × Direct qPCR Mix-Taqman, ko nodrošina komplekts, ātri iegūstot kvantitatīvus un reāllaika rezultātus.

    5× Direct RT Mix un 2× Direct qPCR Mix-Taqman ir spēcīga inhibitoru tolerance un var veikt efektīvu apvērsumu un specifisku pastiprināšanu, izmantojot parauga lizātu, kas jāmēra kā veidni.Reaģents satur Foregene reverso transkriptāzi, Hot D-Taq DNS polimerāzi, dNTP, MgCl2, reakcijas buferis, PCR optimizētājs un stabilizators, ko var izmantot kopā ar līzes buferi, lai ātri un viegli noteiktu paraugus, un tam piemīt augstas jutības, specifiskuma un stabilitātes īpašības.

    Specifikācijas

    200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

    Komplekta sastāvdaļas

    QuickEasyTMCell Direct RT-qPCR komplekts-Taqman

    Komplekta sastāvdaļas

    20μl qPCR reakcijas sistēma

    DRT-01021 DRT-01022  

    Piezīme

    200 T 1000 T
     

     

    daļa I

    Buferis CL 4 ml 20 ml  

     Šūnu līze

    Foregene Protease Plus II 80 μl 400 μl
    Buferis ST 400 μl 1 ml × 2
     

     

     

    daļa II

    DNS dzēšgumija 80 μl 400 μl
    5 × Direct RT mix* 160 μl 800 μl RT
    2 × tiešais qPCR Mix-Taqman * 1 ml × 2 1,7 ml × 6  

    qPCR

    20×ROX references krāsa 40 μl 200 μl
    RNāzes nesaturošs ddH2O 1,7 ml 10 ml  

    Instrukcijas

    1 gab

    1 gab

     

    *:Cell Lysis, 5 × Direct RT Mix, 2 × Direct qPCR Mix-Taqman var iegādāties atsevišķi

    Īpašības un priekšrocības

    Vienkārši un efektīvi: ar Cell Direct RT tehnoloģiju RNS paraugus var iegūt tikai 7 minūtēs.

    ■ Izlases pieprasījums ir mazs, var pārbaudīt pat 10 šūnas.

    ■ Liela caurlaidspēja: tā var ātri noteikt RNS šūnās, kas kultivētas 384, 96, 24, 12, 6 bedrīšu plāksnēs.

    ■ DNS Eraser var ātri noņemt atbrīvotos genomus, ievērojami samazinot ietekmi uz turpmākajiem eksperimenta rezultātiem.

    ■ Optimizētā RT un qPCR sistēma padara divpakāpju RT-PCR reverso transkripciju efektīvāku un PCR specifiskāku un izturīgāku pret RT-qPCR reakcijas inhibitoriem.

    Komplekta pielietojums

    Pielietojuma joma: kultivētas šūnas.

    - RNS, kas izdalās parauga līzes rezultātā: attiecas tikai uz šī komplekta RT-qPCR veidni.

    - Komplektu var izmantot šādiem mērķiem: gēnu ekspresijas analīzei, siRNS mediētā gēnu klusēšanas efekta pārbaudei, zāļu skrīningam utt.

    Uzglabāšana un glabāšanas laiks

    Šī komplekta I daļa jāuzglabā 4;II daļa jāuzglabā -20 ℃.

     Foregene Protease Plus II jāuzglabā 4℃, nesasaldēt pie -20 ℃.

     2. reaģents×Direct qPCR Mix-Taqman jāuzglabā -20 temperatūrātumsā;ja to lieto bieži, to var uzglabāt arī 4℃ īslaicīgai uzglabāšanai (izlietot 10 dienu laikā).


  • Iepriekšējais:
  • Nākamais:

  • Reālā laika PCR primer dizaina principi

    Forward Primer un Reverse Primer

    Reāllaika PCR gadījumā primer dizains ir ļoti svarīgs.Praimeri ir saistīti ar PCR amplifikācijas specifiku un efektivitāti, un tos var veidot, pamatojoties uz šādiem principiem:

    • Primer garums: 18-30bp.
    • GC saturs: 40-60%.
    • Tm vērtība: Primer projektēšanas programmatūra, piemēram, Primer 5, var norādīt gruntskrāsas Tm vērtību.Augšējā un lejtecē esošo primeru Tm vērtībām jābūt pēc iespējas tuvākām.Var izmantot arī Tm aprēķina formulu: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Veicot PCR, par atkausēšanas temperatūru parasti tiek izvēlēta temperatūra, kas ir zemāka par primera Tm vērtību 5 °C (atbilstošs atkausēšanas temperatūras paaugstinājums var palielināt PCR reakcijas specifiku).
    • Primeri un PCR produkti:
    1. Dizaina primer PCR amplifikācijas produkta garums ir vēlams 100-150 bp.
    2. Pēc iespējas jāizvairās no dizaina gruntēšanas veidnes sekundārajā strukturālajā zonā.
    3. Izvairieties no 2 vai vairāk komplementāru bāzu veidošanās starp augšpus un lejpus esošajiem gruntskrāsām 3′ galiem.
    4. Primer 3′ spailes pamatne nevar būt ar 3 papildu secīgiem G vai C.
    5. Pašiem praimeriem nevar būt komplementāras struktūras, pretējā gadījumā veidosies matadata struktūra, kas ietekmēs PCR amplifikāciju.
    6. ATCG ir jāsadala pēc iespējas vienmērīgāk primeru secībā, un jāizvairās no 3′ gala bāzes kā T.

    Pielikums1:Cell TiešaisRT-qPCR Komplekta sastāvdaļat papildinājumu iepakojums

    1. Šūnu līzes šķīdums

    Šūnu līzes šķīdums

    Komplekta sastāvdaļas

    (24 bedrīšu līzes sistēma / iedobe)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    daļaes

    Buferis CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Buferis ST

    1 ml × 2

    10 ml

    daļaII

    DNS dzēšgumija

    400 μl

    1 ml × 2

    2. RT Mix

    RT maisījums

    Komplekta sastāvdaļas

    (20 μl reakcijas sistēma)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5 × tiešā RT sajaukšana

    800 μl

    RNāzes nesaturošs ddH2O

    1,7 ml × 2

    3.qPCR Mix

    qPCR maisījums

    Komplekta sastāvdaļas

    (20 μl reakcijas sistēma)

    DRT-01021-C1

    DRT-01021-C2

    200 T

    1000 T

    2× Direct qPCR Mix-Taqman

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    20× ROX atsauces krāsa

    40 μl

    200 μl

    RNāzes nesaturošs ddH2O

    1,7 ml

    10 ml

     

    Lietošanas rokasgrāmatas:

     Quick Easy Cell Direct RT-qPCR komplekts-Taqman

    Uzrakstiet savu ziņu šeit un nosūtiet to mums