ForeDirect RT-qPCR komplekts
Komplekta apraksts:
◮RNS tiešai reāllaika pastiprināšanai no uztriepju kolekcijām bez RNS attīrīšanas procesiem.Šis komplekts pabeidz qRT-PCR ciklus vienas stundas laikā.Enzīmu maisījums ir optimizēts reversās transkriptāzes, Hot-Start Taq DNS polimerāzes, RNāzes inhibitora maisījums.Reakcijas buferis satur visus nepieciešamos komponentus, tostarp optimizētos bufera komponentus, Mg2+, dUTP un dNTP.
Apraksts
ForeDirect RT-qPCR komplekts ir paredzēts RNS tiešai reāllaika pastiprināšanai no uztriepju kolekcijām bez RNS attīrīšanas procesiem.Šis komplekts pabeidz qRT-PCR ciklus vienas stundas laikā.Enzīmu maisījums ir optimizēts reversās transkriptāzes, Hot-Start Taq DNS polimerāzes, RNāzes inhibitora maisījums.Reakcijas buferis satur visus nepieciešamos komponentus, tostarp optimizētos bufera komponentus, Mg2+, dUTP un dNTP.
Specifikācijas
100T
Komplekta sastāvdaļas
| Nukleīnskābju atbrīvošanās līdzeklis |
| RNS aizsarglīdzeklis |
| 2 × RT-qPCR buferis |
| Enzīmu maisījums (Taq&M-MLV) |
| Instrukcijas |
PCR pielietojums
1. Kad PCR reakcijas mēģenes ir īslaicīgi centrifugētas, ievietojiet tās amplifikācijas instrumenta paraugu tvertnē.
2. Termiskais protokols
| Solis | Temperatūra | Laiks | Cikli | |
| 1 | Reversā transkripcija | 50℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Iepriekšēja denaturācija | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturācija | 95℃ | 10 sekundes | 42 |
| 4 | Atlaidināšana / pagarināšana | 60℃ | 30 sekundes | |
Piezīme:Fluorescējošais signāls tika atklāts tūlīt pēc katra cikla pagarināšanas posma.
3. Pēc iestatīšanas saglabājiet failu un palaidiet reakcijas programmu.
Darbības soļi
Pirms reaģenta sagatavošanas visi komplektā esošie reaģenti jāatkausē istabas temperatūrā un uzmanīgi jāsamaisa.
Reaģenta sagatavošana
1. Sagatavojiet nukleīnskābju atbrīvošanas maisījumu
| Komponents | Parauga vai kontroles tilpums |
| Nukleīnskābju atbrīvošanās līdzeklis | 5μL |
| RNS aizsarglīdzeklis | 0,5 μL |
2. Sagatavojiet reakcijas maisījumu
| Komponents | Parauga vai kontroles tilpums |
| 2 × RT-qPCR buferis | 15 μL |
| Enzīmu maisījums (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primers un zondes | 1 μL |
Uzglabāšana un glabāšanas laiks
-Komplekts jāuzglabā -20± 5℃.Derīguma termiņš ir 12 mēneši.
-Izvairieties no atkārtotiem sasaldēšanas-atkausēšanas cikliem (<5 cikli).
