Antivielas, ko sauc arī par imūnglobulīniem (Ig), ir glikoproteīni, kas specifiski saistās ar antigēniem.
 
Tradicionālo antivielu preparātu ražo, imunizējot dzīvniekus un savācot antiserumu.Tāpēc antiserums parasti satur antivielas pret citiem nesaistītiem antigēniem un citiem seruma olbaltumvielu komponentiem.Vispārējās antigēnu molekulas lielākoties satur vairākus dažādus epitopus, tāpēc parastās antivielas ir arī antivielu maisījums pret vairākiem dažādiem epitopiem.Pat parastās seruma antivielas, kas vērstas pret vienu un to pašu epitopu, joprojām sastāv no heterogēnām antivielām, ko ražo dažādi B šūnu kloni.Tāpēc parastās seruma antivielas sauc arī par poliklonālajām antivielām vai saīsināti poliklonālajām antivielām.
 
Monoklonālā antiviela (monoklonālā antiviela) ir ļoti viendabīga antiviela, ko ražo viens B šūnu klons un ir vērsta tikai pret konkrētu epitopu.To parasti sagatavo, izmantojot hibridomas tehnoloģiju – hibridomas antivielu tehnoloģija balstās uz šūnu saplūšanas tehnoloģiju, apvienojot B šūnas ar spēju izdalīt specifiskas antivielas un mielomas šūnas ar bezgalīgu augšanas spēju B šūnu hibridomās.Šai hibridomas šūnai ir vecāku šūnas īpašības.Tas var vairoties bezgalīgi un nemirstīgi in vitro kā mielomas šūnas, un tas var sintezēt un izdalīt specifiskas antivielas, piemēram, liesas limfocītus.Ar klonēšanu var iegūt monoklonālu līniju, kas iegūta no vienas hibridomas šūnas, tas ir, hibridomas šūnu līniju.Tās ražotās antivielas ir ļoti viendabīgas antivielas pret vienu un to pašu antigēnu determinantu, tas ir, monoklonālajām antivielām.
 
Antivielas pastāv kā viens vai vairāki Y formas monomēri (ti, monoklonālās antivielas vai poliklonālās antivielas).Katrs Y formas monomērs sastāv no 4 polipeptīdu ķēdēm, ieskaitot divas identiskas smagās ķēdes un divas identiskas vieglās ķēdes.Vieglās un smagās ķēdes tiek nosauktas pēc to molekulmasas.Y formas struktūras augšdaļa ir mainīgais reģions, kas ir antigēna saistīšanās vieta.(Fragments no Detai bio-monoklonālo antivielu koncepcijas)
 
Antivielu struktūra
Smagā ķēde
Ir pieci zīdītāju Ig smago ķēžu veidi, kas nosaukti ar grieķu burtiem α, δ, ε, γ un μ.Atbilstošās antivielas sauc par IgA, IgD, IgE, IgG un IgM.Dažādas smagās ķēdes atšķiras pēc izmēra un sastāva.α un γ satur aptuveni 450 aminoskābes, savukārt μ un ε satur aptuveni 550 aminoskābes.
Katrai smagajai ķēdei ir divi reģioni: pastāvīgais reģions un mainīgais reģions.Visām viena tipa antivielām ir vienāds konstants reģions, taču pastāv atšķirības starp dažāda veida antivielām.Smago ķēžu konstantie reģioni γ, α un δ sastāv no trim Ig domēniem tandēmā ar viras apgabalu, lai palielinātu tā elastību;smago ķēžu konstantie apgabali μ un ε sastāv no 4 Ig domēniem.Dažādu B šūnu ražotās antivielas smagās ķēdes mainīgais reģions ir atšķirīgs, bet vienas un tās pašas B šūnas vai šūnu klona ražotās antivielas mainīgais reģions ir vienāds, un katras smagās ķēdes mainīgais apgabals ir aptuveni 110 aminoskābes garš., Un veido vienu Ig domēnu.
 
Gaismas ķēde
Zīdītājiem ir tikai divu veidu vieglās ķēdes: lambda tipa un kappa tipa.Katrai vieglajai ķēdei ir divi saistīti domēni: konstants reģions un mainīgais reģions.Vieglās ķēdes garums ir aptuveni 211–217 aminoskābes.Abas vieglās ķēdes, kas atrodas katrā antivielā, vienmēr ir vienādas.Zīdītājiem katras antivielas vieglajai ķēdei ir tikai viens veids: kappa vai lambda.Dažiem zemākiem mugurkaulniekiem, piemēram, skrimšļa zivīm (skrimšļa zivīm) un kaulainajām zivīm, ir sastopamas arī cita veida vieglās ķēdes, piemēram, jota (iota) tips.
 
Fab un Fc segmenti
Fc segmentu var tieši kombinēt ar fermentiem vai fluorescējošām krāsvielām, lai marķētu antivielas.Tā ir daļa, kur ELISA procesa laikā antiviela tiek kniedēta uz plāksnes, un tā ir arī daļa, kurā otrā antiviela tiek atpazīta un piesaistīta imūnprecipitācijā, imūnblotēšanas un imūnhistoķīmijas pētījumos.Antivielas var hidrolizēt divos F(ab) segmentos un vienā Fc segmentā, izmantojot proteolītiskus enzīmus, piemēram, papaīnu, vai arī tās var atdalīt no eņģes apgabala ar pepsīnu un hidrolizēt vienā F(ab)2 segmentā un vienā Fc segmentā.IgG antivielu fragmenti dažreiz ir ļoti noderīgi.Fc segmenta trūkuma dēļ F(ab) segments neizgulsnēsies ar antigēnu, kā arī imūnās šūnas to neuztvers in vivo pētījumos.Mazo molekulāro fragmentu un šķērssaistīšanas funkcijas trūkuma dēļ (Fc segmenta trūkuma dēļ) Fab segmentu parasti izmanto radioaktīvai iezīmēšanai funkcionālos pētījumos, un Fc segmentu galvenokārt izmanto kā bloķējošu līdzekli histoķīmiskajā krāsošanā.
 
Mainīgie un nemainīgie reģioni
Mainīgais reģions (V reģions) atrodas 1/5 vai 1/4 (satur apmēram 118 aminoskābju atlikumus) no H ķēdes netālu no N-gala un 1/2 (satur apmēram 108-111 aminoskābju atlikumus) netālu no L ķēdes N-gala.Katrā V reģionā ir peptīda gredzens, ko veido iekšējās ķēdes disulfīda saites, un katrs peptīda gredzens satur aptuveni 67 līdz 75 aminoskābju atlikumus.Aminoskābju sastāvs un izvietojums V reģionā nosaka antivielas antigēna saistīšanās specifiku.Tā kā V reģionā pastāvīgi mainās aminoskābju veidi un secība, var veidoties daudzu veidu antivielas ar atšķirīgu saistošo antigēnu specifiku.L ķēdes un H ķēdes V reģionus sauc attiecīgi par VL un VH.VL un VH dažu vietējo reģionu aminoskābju sastāvam un secībai ir lielāka variāciju pakāpe.Šos reģionus sauc par hipermainīgiem reģioniem (HVR).Aminoskābju sastāvs un ne-HVR daļu izvietojums V reģionā ir salīdzinoši konservatīvs, ko sauc par karkasa reģionu.VL ir trīs hipermainīgi reģioni, kas parasti atrodas attiecīgi pie aminoskābju atlikumiem no 24 līdz 34 un 89 līdz 97.Trīs VL un VH HVR tiek saukti attiecīgi par HVR1, HVR2 un HVR3.Rentgenstaru kristālu difrakcijas izpēte un analīze pierādīja, ka hipermainīgais reģions patiešām ir vieta, kur saistās antivielu antigēns, tāpēc to sauc par komplementaritāti noteicošo reģionu (CDR).VL un VH HVR1, HVR2 un HVR3 var saukt attiecīgi par CDR1, CDR2 un CDR3.Parasti CDR3 ir augstāka hipermainības pakāpe.Hipermainīgais reģions ir arī galvenā vieta, kur pastāv Ig molekulu idiotipiskie determinanti.Vairumā gadījumu H ķēdei ir lielāka nozīme saistīšanā ar antigēnu.
Pastāvīgais reģions (C reģions)atrodas 3/4 vai 4/5 (aptuveni no 119. aminoskābes līdz C galam) H ķēdē netālu no C gala un 1/2 (satur apmēram 105 aminoskābju atlikumus) netālu no L ķēdes C gala.Katrs H ķēdes funkcionālais reģions satur apmēram 110 aminoskābju atlikumus un satur peptīdu gredzenu, kas sastāv no 50–60 aminoskābju atlikumiem, kas savienoti ar disulfīda saitēm.Šī reģiona aminoskābju sastāvs un izvietojums ir relatīvi nemainīgs tajā pašā dzīvnieku Ig izotipa L ķēdē un tajā pašā H ķēdē.Tas pats, tas var tikai specifiski saistīties ar atbilstošo antigēnu, bet tā C reģiona struktūra ir tāda pati, tas ir, tam ir tāda pati antigenitāte.Zirga anti-cilvēka IgG sekundāro antivielu (vai anti-antivielu) var kombinēt ar abām. Rodas antivielu (IgG) kombinācija pret dažādiem eksotoksīniem.Tas ir svarīgs pamats sekundāro antivielu sagatavošanai un fluoresceīna, izotopu, fermentu un citu marķētu antivielu pielietošanai.
 
 
Saistītie produkti:
Cell Direct RT-qPCR komplekts