• facebook
  • linkedin
  • youtube

Laboratorijas testēšana sākas ar paraugu ņemšanu, un paraugu ņemšanu ir visvieglāk aizmirst.Svarīgākais paraugu ņemšanā ir izvēlēties pareizo parauga veidu, izmantot atbilstošus paraugu ņemšanas rīkus un veikt saprātīgu transportēšanu un apstrādi.

I.Parauga veids

Izplatītākie paraugu veidi ir šādi:

dsafgsd

Paraugu ņemšanas metode var attiekties uz jaunā koronavīrusa vides monitoringa tehniskajām specifikācijām lauksaimniecības tirdzniecības (bazāra) tirgū”:

1. Uztriepju paraugi no rīkles tamponiem, rokām, drēbēm un citiem praktizējošu praktizētāju priekšmetiem: vīrusa paraugu ņemšanas mēģenē ir jāizmanto vīrusa konservēšanas šķīdums un pilnībā jāiefiltrē parauga ņemšanas vates tamponi.Zemes virsmu) atkārtoti uzklāj un skalo vairāk nekā 3 reizes.Tajā pašā laikā ir nepieciešams veikt vairāku punktu sadalītu paraugu ņemšanu uz parauga objekta virsmas.

2. Pārtikas virsmas uztriepju paraugi: pārtikas paraugus nevar savākt tieši.Pirms tamponu paraugu ņemšanas ņemamā pārtika rūpīgi jāatdala un jāuzglabā tīrā paraugu ņemšanas maisā.Nepieciešams izmantot vīrusu konservēšanas šķīdumu vīrusu paraugu ņemšanas mēģenē, pēc pilnīgas parauga ņemšanas vates tampona izmērcēšanas, lai vairāk nekā 3 reizes vairākkārt smērētu un noskalotu ņemamā pārtikas parauga virsmu.Tajā pašā laikā ir nepieciešams veikt vairāku punktu sadalītu paraugu ņemšanu parauga virsmā.

3. Notekūdeņu paraugi: atbilstoši drenāžas sistēmas sadalījumam tirgū izvēlieties 2–3 notekūdeņu paraugu ņemšanas vietas, koncentrējoties uz iekšējo cauruļu tīkla savākšanu, ūdens plūsmas virziena lejup pa straumi vai savienojumu ar pašvaldības cauruļu tīklu.Lai savāktu tamponu paraugu, iegremdējiet to notekūdeņos ar paraugu ņemšanas vates tamponu, lai tas adsorbētu notekūdeņus, un izskalojiet to paraugu ņemšanas mēģenē vairāk nekā 3 reizes.Lai savāktu notekūdeņu paraugus, izmantojiet polietilēna plastmasas pudeles, lai savāktu 30-500 mL notekūdeņu paraugus;notekūdeņu savākšanai, kuru tilpums ir lielāks par 500 ml, var izmantot polietilēna plastmasas spaiņus vai uz vietas esošo ūdens paraugu ņemšanas speciālo bagātināšanas iekārtu.Tajā pašā laikā notekūdeņu paraugu ņemšanas vietai ir jāveic vairāku punktu sadalīta paraugu ņemšana.

4. Dzīvnieku paraugi: dzīviem dzīvniekiem paraugu ņemšanas tamponus var izmantot, lai savāktu ķermeņa virsmas uztriepes, mutes un rīkles uztriepes un tūpļa uztriepes, kā arī var savākt ekskrementu vai sekrēta paraugus un attiecīgi reģistrēt tos reģistrācijas lapā.Dzīvnieku paraugiem, kuriem veikta ādas noņemšana utt., izmantojiet vates tamponus, lai savāktu ķermeņa virsmas un ķermeņa dobuma tamponu paraugus.Ir nepieciešams izmantot vīrusa konservēšanas šķīdumu vīrusa paraugu ņemšanas mēģenē, lai pilnībā iefiltrētos parauga ņemšanas vates tamponā, un pēc tam atkārtoti uzklāt ņemamā pārtikas parauga virsmu.Shabu vairāk nekā 3 reizes.Tajā pašā laikā ir nepieciešams veikt vairāku punktu sadalītu paraugu ņemšanu parauga virsmā.

5. Citas ierīces: konteineri dzīvnieku pārvadāšanai un audzēšanai, piemēram, būri vai zivju tvertnes.Vispirms novērojiet vai izprotiet konkrētos dzīvnieku veidus, kas tiek glabāti un audzēti konteinerā, un savāciet uztriepes paraugus uz tvertnes iekšējās sienas vai šķidruma satura paraugus.

6. Savākt aerosola paraugus vietās, kur pulcējas cilvēki, slikti vēdināmās vietējās tirdzniecības vietās, birojos un atpūtas telpās.

II.Paraugu ņemšanas instrumenti
1. Asins savākšanas caurule
Ja vēlāk jāveic nukleīnskābju pārbaude un antikoagulantu paraugi, asins savākšanai ieteicams izmantot vakuuma asinsvadu, kas satur EDTA antikoagulantu;seruma paraugiem ieteicams izmantot vakuuma asinsvadu bez antikoagulanta.

fdsgfd

2. Paraugu ņemšanas tampons

Ieteicams izmantot polipropilēna tamponus, nevis kalcija algināta tamponus vai tamponus ar koka stabiņiem, jo ​​tie var saturēt vielas, kas inaktivē noteiktus vīrusus un kavē PCR testēšanu.Tamponus ar vates galviņām nevar izmantot, jo kokvilnas šķiedrām ir spēcīga olbaltumvielu adsorbcija un tās nav viegli eluējušās nākamajā konservēšanas šķīdumā.

“Tehniskajās specifikācijās 10-in-1 jauktai jaunu koronavīrusa nukleīnskābju savākšanai un noteikšanai” ir skaidri noteikts, ka “paraugu ņemšanas tamponam jābūt izgatavotam no poliestera, neilona un citiem materiāliem, kas nav kokvilna un kalcija algināts, un rokturim jābūt izgatavotam no materiāla, kas nav koks.Lūzuma punkts ir apmēram 3 cm no tampona galvas augšdaļas, ko ir viegli salauzt.

ASV CDC arī minēja: “Izmantojiet tikai sintētisko šķiedru tamponus ar plastmasas vai stiepļu vārpstām.Neizmantojiet kalcija algināta tamponus vai tamponus ar koka kātiņām,jo tie var saturēt vielas, kas inaktivē dažus vīrusus un kavē PCR testēšanu.

Pašlaik plaši tiek izmantots vienreizējās lietošanas sterils neilona flokēšanas tampons, kas apvienots ar plastmasas stieni.Plūkšanas tamponam ir labāka ūdens uzsūkšanās un izdalīšanās ātrums.Atbilstoši dažādām paraugu ņemšanas vietām tamponu galvai ir arī dažādi izmēri un šķiedras.Biezums.”

fsdg

3. Transportēšanas konservēšanas risinājuma paraugs

Vīrusu inaktivācijas saglabāšanas šķīdums: atbilstošs guanidīna sāls koncentrācijas daudzums un dažādi vīrusa līzes komponenti var tieši lizēt vīrusu, lai atbrīvotu nukleīnskābi, inaktivētu RNāzi un DNāzi un nodrošinātu nukleīnskābes integritāti, ko var izmantot turpmākai qPCR noteikšanai.To nevar izmantot vīrusu audzēšanai un izolēšanai.

Vīrusa transportēšanas un konservēšanas šķīdums: satur vīrusa izdzīvošanai nepieciešamos sāļus, aminoskābes, vitamīnus, glikozi un olbaltumvielas, kas spēj uzturēt vīrusa aktivitāti.To var izmantot nukleīnskābju ekstrakcijai un vīrusa noteikšanai nākotnē, kā arī to var izmantot vīrusa kultivēšanai un atdalīšanai.

4. Paraugu saglabāšanas caurule un paraugu maisiņš

Paraugu uzglabāšanas caurulei jābūt sterilai plastmasas caurulei ar skrūvējamu vāciņu, kas neadsorbē nukleīnskābi.Katra parauga caurule jāpārklāj ar parauga maisiņu, lai novērstu parauga noplūdi un piesārņojumu.

fdsdf

III.Interferences vielas paraugā

Traucējošās vielas PCR eksperimentos

1. endogēns traucējums

Ķermeņa paraugā esošās vielas var traucēt citu vielu noteikšanu.

Asinis:hēms (>1mg/ml), hemīns (>0,1ng/μl), triglicerīdi, IgG utt.;

Urīns:urīnviela (20 mM);

Izkārnījumi:augu polisaharīdi, holāts;

Audi:proteāze, kolagēns;

Piens: proteāze, kalcija jons;

Narkotikas: antibiotikas, pretvīrusu zāles, hormoni utt.

cits.

2. eksogēni traucējumi

Tas nāk no vielām, kas var traucēt citu vielu noteikšanu in vitro.Paraugu piedevas un vielas, ar kurām var saskarties paraugu ņemšanas un apstrādes laikā:

Pārbaudes materiāli: seruma atdalīšanas želeja, paraugu savākšanas konteiners un gumijas aizbāznis, katetrs, katetra skalošanas šķidrums, cimdu pulveris utt.

Antikoagulants: heparīns (>0,1 U/mL), EDTA (>0,5 mM) utt.;

Organiskie šķīdinātāji: izopropanols (>0,1 IU/ml), betaīns, dimetilsulfoksīds, formamīds, glicerīns, PEG u.c.;

Dezinfekcijas līdzekļi: spirti (etanols>1%), aldehīdi, fenoli (fenols>0,2%), peroksīdi, stiprās skābes (HCL), spēcīgi sārmi (NaOH) u.c.;

Mazgāšanas līdzeklis:SDS (>0,005%);

Augsne: Humuss

Krāsviela: Indigo

cits.

Faktiskos āra paraugu ņemšanas apstākļos, piemēram, vācot vides paraugus, paraugi var saturēt dažādas traucējošas vielas, un traucējošo vielu sastāvs katrā vietā ir atšķirīgs, tādēļ PCR traucējumu eksperimenti ir jāveic atbilstoši vietējiem apstākļiem.

IV.Paraugu uzglabāšanas un transportēšanas nosacījumi

Svaigi savāktie klīniskie paraugi jānosūta uz laboratoriju 2 līdz 4 stundu laikā pēc savākšanas 2°C līdz 8°C temperatūrā.Uzglabāt 4 ℃ 24 stundu laikā.Vīrusa izolēšanai un nukleīnskābju noteikšanai izmantotie paraugi jāpārbauda pēc iespējas ātrāk.Paraugus, kurus var pārbaudīt 24 stundu laikā, var uzglabāt 4°C temperatūrā;paraugi, kurus nevar noteikt 24 stundu laikā, jāuzglabā -70°C vai zemākā temperatūrā (ja nē- Uzglabāt 70°C temperatūrā ledusskapī -20°C).

Kopsavilkums:Standartizēta paraugu ņemšana, transportēšana un uzglabāšana ir būtiska turpmākai testēšanai.Daudzu laboratorijas testu viltus negatīvos rezultātus izraisa nepareiza paraugu savākšana, transportēšana un uzglabāšana, kas izraisa vīrusu nukleīnskābes noārdīšanos.Tomēr daudzas laboratorijas joprojām ignorē paraugu ņemšanas nozīmi.Es ceru, ka šis raksts var modināt ikviena uzmanību paraugu ņemšanai un padarīt paraugu ņemšanu zinātniskāku un saprātīgāku!

Saistīts produkts:

SARS-CoV-2 varianta nukleīnskābes noteikšanas komplekts (I) (multipleksā PCR fluorescējošās zondes metode) — Brazīlijas, Dienvidāfrikas un Apvienotās Karalistes mutantu noteikšanai


Izlikšanas laiks: 17. septembris 2021