• facebook
  • linkedin
  • youtube
page_banner

Augu kopējās RNS izolācijas komplekts Kopējais RNS attīrīšanas komplekts augiem ar zemu polisaharīdu un polifenolu saturu

Komplekta apraksts:

Kat.Nr.RE-05011/05014

Kopējās RNS attīrīšanai no vispārējiem augu paraugiem, kas satur zemu polisaharīdu un polifenolu komponentus.

Ātri ekstrahējiet augstas kvalitātes kopējo RNS no augu paraugiem ar zemu polisaharīdu un polifenolu saturu.

Bez RNāzes

Efektīvi noņemiet DNS, izmantojot DNS tīrīšanas kolonnu

Noņemiet DNS, nepievienojot DNāzi

Vienkārši — visas darbības tiek veiktas istabas temperatūrā

Ātri — darbību var pabeigt 30 minūtēs

Drošs — netiek izmantots organiskais reaģents


Produkta informācija

Produktu etiķetes

FAQ

LEJUPIELĀDĒJIET RESURSU

Specifikācijas

50 sagatavošanās, 200 sagatavošanās

Komplektā tiek izmantota Foregene izstrādātā centrifūga un formula, kas var efektīvi ekstrahēt augstas tīrības pakāpes un kvalitatīvu kopējo RNS no dažādiem augu audiem ar zemu polisaharīdu un polifenolu saturu.Augu paraugiem ar augstu polisaharīdu vai polifenolu saturu ieteicams izmantot Plant Total RNA Isolation Plus komplektu, lai iegūtu labākus RNS ekstrakcijas rezultātus.Komplektā ir DNS tīrīšanas kolonna, kas var viegli noņemt genoma DNS no supernatanta un audu lizāta.Tikai RNS kolonna var efektīvi saistīt RNS.Komplekts vienlaikus var apstrādāt lielu skaitu paraugu.

Visa sistēma nesatur RNāzi, tāpēc attīrītā RNS netiks noārdīta.Buferis PRW1 un buferis PRW2 var nodrošināt, ka iegūtā RNS nav piesārņota ar olbaltumvielām, DNS, joniem un organiskiem savienojumiem.

Komplekta sastāvdaļas

Buferis PSL1, buferis PS, buferis PSL2

Buferis PRW1, buferis PRW2

RNāzes nesaturošs ddH2O, DNS tīrīšanas kolonna

Tikai RNS kolonna

Instrukcijas

Īpašības un priekšrocības

■ Darbība istabas temperatūrā (15-25 ℃) visa procesa laikā, bez ledus vannas un zemas temperatūras centrifugēšanas.
■ Pilnīgs komplekts bez RNāzes, nav jāuztraucas par RNS degradāciju.
■ DNS tīrīšanas kolonna īpaši saistās ar DNS, lai komplekts varētu noņemt genoma DNS piesārņojumu, nepievienojot DNāzi.
■ Augsts RNS iznākums: tikai RNS saturoša kolonna un unikāla formula var efektīvi attīrīt RNS.
■ Ātrs ātrums: viegli darbināms, un to var pabeigt 30 minūšu laikā.
■ Drošība: nav nepieciešams organiskais reaģents.
■ Augsta kvalitāte: attīrītie RNS fragmenti ir augstas tīrības pakāpes, nesatur olbaltumvielas un citus piemaisījumus, un tos var izmantot dažādiem pakārtotiem eksperimentāliem lietojumiem.

123

Komplekta pielietojums

Tas ir piemērots kopējās RNS ekstrakcijai un attīrīšanai no svaigiem vai saldētiem augu audu paraugiem (īpaši svaigiem augu lapu audiem) ar zemu polisaharīdu un polifenolu saturu.

Darba plūsma

rūpnīcas kopējā RNS vienkārša darbplūsma

Diagramma

Augu kopējās RNS izolācijas komplekts6

Plant Total RNA Isolation Kit Plus apstrādāja 50 mg svaigu polisaharīdu un polifenolu lapu, un 5% attīrītas RNS tika pārbaudītas ar elektroforēzi.
1: banāns
2: Ginkgo
3: kokvilna
4: Granātābols

Uzglabāšana un glabāšanas laiks

Komplektu var uzglabāt 12 mēnešus istabas temperatūrā (15–25 ℃) sausā vidē un 2–8 ℃ ilgāk (24 mēnešus).

Buferšķīdumu PSL1 var uzglabāt 4 ℃ 1 mēnesi pēc 2-hidroksi-1-etāntiola pievienošanas (pēc izvēles).


  • Iepriekšējais:
  • Nākamais:

  • Problēmu analīzes rokasgrāmata

    Tālāk ir sniegta to problēmu analīze, ar kurām jūs varat saskartiesAugu kopāRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

    Centrifugēšanas kolonna ir aizsērējusi

    Centrifugēšanas kolonnas bloķēšana izraisīs RNS iznākuma samazināšanos vai pat to nevarēs attīrīt, lai iegūtu RNS, un iegūtās RNS kvalitāte būs zema.

    Bieži sastopamo iemeslu analīze:

    1. Paraugs nav pilnībā salauzts.

    Nepilnīga parauga fragmentācija var bloķēt DNS tīrīšanas kolonnu, kas var ietekmēt arī RNS iznākumu un kvalitāti.Mēs iesakām, veicot paraugu sadrumstalotību, ātri samalt pietiekamā daudzumā šķidrā slāpekļa, lai pēc iespējas vairāk sadalītu paraugu audus, piemēram, šūnu sienas un šūnu membrānas.Polifenola polisaharīdu augu paraugiem mēs iesakām izmantot Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

    2.Aspirējiet DNS tīrīšanas kolonnas izolēto supernatantu, aspirējiet iespējamo šūnu atlieku granulu.

    Aspirēta šūnu atlieku granula var aizsprostot tikai RNS kolonnu RNS adsorbcijas procedūru laikā (skatiet procedūras 5. darbību, polisaharīda polifenola procedūras 6. darbību).Mēs iesakām ievērot piesardzību, aspirējot šo supernatantu, lai izvairītos no šūnu atlieku aspirācijas.

    3. Sākotnējais parauga daudzums ir pārāk liels.

    Pārmērīga parauga izmantošana izraisīs nepilnīgu parauga sadrumstalotību vai nepilnīgu šūnu līzi, izmantojot buferi PRL1 vai buferi PSL1, kā rezultātā attīrīšanas operācijām tiks aizsērējusi attīrīšanas kolonna.Augu kopējās RNS izolācijas komplekta sākotnējais maksimālais daudzums ir 50 mg vienā operētā parauga attīrīšanā.Polifenola polisaharīdu augu paraugiem iesakām izmēģināt Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

    4. Centrifūgas temperatūra ir pārāk zema.

    Visa RNS izolēšana un attīrīšana, izņemot parauga audu izjaukšanu ar šķidro slāpekli, visas darbības veic istabas temperatūrā (20-25 °C).Dažām zemas temperatūras centrifūgām temperatūra ir zemāka par 20 °C, kas var izraisīt aizsprostojumus DNS tīrīšanas kolonnā un/vai kolonnā, kas satur tikai RNS.Ja tā notiek, iestatiet centrifūgas temperatūru uz 20–25 °C un iepriekš sasildiet līzes maisījumu un/vai etanola atdalīšanas supernatantu līdz 37 °C.

    RNS netiek ekstrahēts vai RNS iznākums ir zems

    Parasti ir daudz faktoru, kas ietekmē reģenerācijas efektivitāti, piemēram: parauga RNS saturs, darbības metode, eluēšanas tilpums utt.

    Biežāko cēloņu analīze, kā norādīts tālāk:

    1.Operācijas laikā tika veikta ledus vanna vai zemas temperatūras (4°C) centrifugēšana.

    Ieteikums: Darbināt istabas temperatūrā (15-25°C) visā procesā, neveikt ledus vannu un zemas temperatūras centrifugēšanu.

           2.RNS ir degradēta nepareizas parauga saglabāšanas vai ilgstošas ​​parauga saglabāšanas dēļ.

    Ieteikums: Svaigi savāktos paraugus ātri jāsasaldē šķidrā slāpeklī un pēc tam ilgstoši jāuzglabā -80°C, jāizvairās no atkārtotas paraugu sasaldēšanas un atkausēšanas;vai nekavējoties iemērc paraugus RNS stabilizatora RNAlater šķīdumā (dzīvnieku paraugi).

           3.Nepietiekama parauga sadrumstalotība un līze noved pie attīrīšanas kolonnas bloķēšanas.

    Ieteikums: Sasmalcinot salveti, lūdzu, pārliecinieties, vai audi ir pietiekami samalti, un ātri pārnesiet to uz iepriekš sagatavotu buferšķīdumu PSL1 (apstipriniet, ka ir pievienota pareizā β-ME proporcija, skatiet procedūras 1. darbību).

    4.Eluents tika pievienots nepareizi.

    Ieteikums: pārliecinieties, vai RNase-Free ddH2O tiek pilināts attīrīšanas kolonnas membrānas vidū.

    5. Buferim PSL2 vai buferim PRW2 netika pievienots pareizais absolūtā etanola daudzums.

    Ieteikums: lūdzu, ievērojiet norādījumus, pievienojiet pareizo absolūtā etanola daudzumu buferšķīdumam PSL2 un buferšķīdumam PRW2 un labi samaisiet pirms komplekta lietošanas.

    6.Audu parauga daudzums nav piemērots.

    Ieteikums: izmantojiet 50 mg audu uz 500 μl buferšķīduma PSL1.Lietojot pārāk daudz audu, samazināsies iegūtās RNS daudzums, kā arī samazināsies iegūtās RNS tīrība.Mēs stingri iesakām, ka sākotnējā parauga deva nedrīkst pārsniegt 50 mg vienā RNS ekstrakcijas operācijā.

    7. Nepiemērots eluēšanas tilpums vai nepilnīga eluēšana.

    Ieteikums: Attīrīšanas kolonnas eluenta tilpums ir 50-200 μl;ja eluēšanas efekts nav apmierinošs, ieteicams pagarināt laiku istabas temperatūrā pēc iepriekš uzkarsēta RNase-Free ddH pievienošanas.2O, piemēram, 5-10min.

    8. Attīrīšanas kolonnā ir etanola atlikumi pēc mazgāšanas ar buferšķīdumu PRW2.

       Ieteikums: ja tukšā mēģene tiek centrifugēta 1 minūti un pēc mazgāšanas buferšķīdumā PRW2 joprojām ir palicis etanols, varat palielināt tukšās mēģenes centrifugēšanas laiku līdz 2 minūtēm vai novietot attīrīšanas kolonnu istabas temperatūrā uz 5 minūtēm, lai tā būtu pilnībā pabeigta. noņemiet atlikušo etanolu.

    9. Komplekts tika izmantots nepareizi.

       Ieteikums: polifenola polisaharīdu augu paraugiem, izmantojot tādus izplatītus komplektus kā Plant Total RNA Isolation Kit, iespējams, nevarēs iegūt ideālus RNS paraugus.Mēs iesakām izmantot Plant Total RNA IsolationKit Plus, kas ir īpaši izstrādāts polifenola polisaharīdu augu paraugiem.Komplekts, kas īpaši izstrādāts RNS ekstrakcijai no polifenola un polisaharīdu augu paraugiem.

    OD260/OD280 vērtība ir zema

    RNS eluēšana ar ddH2O un izmantots spektrofotometra rādījumiem, rada zemas OD260/OD280 vērtības.Mēs iesakām izmantot 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (nevis RNase-Free ddH2O, lai eluētu RNS), lai iegūtu salīdzinoši pareizas OD260/OD280 vērtības, skatiet “RNS koncentrācijas un attīrīšanas testi” 19. lpp.

    Attīrītā RNS tiek noārdīta

    Attīrītas RNS kvalitāte ir saistīta ar tādiem faktoriem kā parauga saglabāšana, RNāzes piesārņojums un manipulācijas.

    Bieži sastopamo cēloņu analīze:

    1.Audu paraugi pēc savākšanas netika laikus uzglabāti.

        Ieteikums: Ja audu paraugus pēc savākšanas neizmanto laikus, lūdzu, nekavējoties uzglabājiet tos šķidrā slāpeklī zemā temperatūrā vai pēc ātras sasaldēšanas šķidrā slāpeklī pārnesiet uz -80°C ilgstošai uzglabāšanai, vai arī nekavējoties iemērciet paraugus RNS stabilizators RNAlater šķīdums (dzīvnieku paraugi).RNS ekstrakcijai mēģiniet izmantot svaigi savāktus audu paraugus.

    2.Audu paraugu atkārtota sasaldēšana un atkausēšana.

       Ieteikums: Uzglabājot audu paraugus, vislabāk tos sagriezt nelielos gabaliņos konservēšanai un daļu no tiem izņemt, lietojot tos, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa atkārtota paraugu sasaldēšana un atkausēšana.

    3.RNase tiek ieviesta operāciju zālē vai nav valkāti vienreizējie cimdi, maskas utt.

       Ieteikums: RNS ekstrakcijas eksperimentus vislabāk veikt atsevišķās RNS operācijās, un laboratorijas galds pirms eksperimenta ir jānotīra, kā arī eksperimenta laikā jāvalkā vienreizējās lietošanas cimdi un maskas, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa RNāzes ievadīšana vislielākajā mērā.

    4. Lietošanas laikā reaģents ir piesārņots ar RNāzi.

       Ieteikums: nomainiet ar jaunu augu kopējās RNS ekstrakcijas komplektu sēriju saistītiem eksperimentiem.

    5. Centrifūgas mēģenes un pipetes uzgaļi, ko izmanto RNS manipulācijām, ir piesārņoti ar RNāzi.

    Ieteikums: Pārliecinieties, vai RNS ekstrakcijā izmantotās centrifūgas mēģenes, pipešu uzgaļi, pipetes utt. ir bez RNāzes.

    Lietošanas rokasgrāmatas:

    Augu kopējās RNS izolācijas komplekta lietošanas instrukcija

    Uzrakstiet savu ziņu šeit un nosūtiet to mums