Vīrusu DNS un RNS izolācijas komplekts Vīrusu DNS un RNS ekstrakcijas attīrīšanas sagatavošanas komplekti
Specifikācijas
50 sagatavošanās, 200 sagatavošanās
Vīrusu RNS nukleīnskābju attīrīšanas ekstrakcijas izolācijas komplektā tiek izmantota Foregene izstrādātā centrifūga un formula, kas var efektīvi ekstrahēt augstas tīrības pakāpes un augstas kvalitātes vīrusu RNS no tādiem paraugiem kā plazma, serums, ķermeņa šķidrums bez šūnām un šūnu kultūras supernatanta.Komplektā ir īpaši pievienots lineārais akrilamīds, kas var viegli uztvert nelielu daudzumu RNS no paraugiem.Tikai RNS kolonna var efektīvi saistīt RNS.Komplekts vienlaikus var apstrādāt lielu skaitu paraugu.
Viss komplekts nesatur RNāzi, tāpēc attīrītā RNS netiks noārdīta.Buferis viRW1 un buferis viRW2 var nodrošināt, ka iegūtā vīrusa nukleīnskābe nesatur proteīnu, nukleāzi vai citus piemaisījumus, ko var tieši izmantot pakārtotajiem molekulārās bioloģijas eksperimentiem.
Komplekta sastāvdaļas
| Lineārais akrilamīds |
| Buferis DRL |
| Buferis RW1, Buferis RW2 |
| RNāzes nesaturošs ddH2O |
| DNS/RNS kolonna |
| Instrukcijas |
Īpašības un priekšrocības
■ Darbība istabas temperatūrā (15-25 ℃) visa procesa laikā, bez ledus vannas un zemas temperatūras centrifugēšanas.
■ Pilnīgs komplekts bez RNāzes, nav jāuztraucas par RNS degradāciju.
■ Augsts nukleīnskābju daudzums: tikai DNS/RNS Kolonna un unikāla formula var efektīvi attīrīt DNS un RNS.
■ Liela paraugu apstrādes jauda: katru reizi var apstrādāt līdz 200μl paraugu.
■ Ātrs ātrums: viegli darbināms un to var pabeigt 20 minūšu laikā.
■ Drošība: nav nepieciešams organiskais reaģents.
■ Augsta kvalitāte: attīrītie RNS fragmenti ir augstas tīrības pakāpes, nesatur olbaltumvielas un citus piemaisījumus, un tos var izmantot dažādiem pakārtotiem eksperimentāliem lietojumiem.
Komplekta pielietojums
Tas ir piemērots vīrusu nukleīnskābju ekstrakcijai un attīrīšanai tādos paraugos kā plazma, serums, bezšūnu ķermeņa šķidrums un šūnu kultūras supernatants.
Darba plūsma
Diagramma
Uzglabāšana un glabāšanas laiks
■ Šo komplektu var uzglabāt 24 mēnešus sausos apstākļos istabas temperatūrā (15-25℃);ja nepieciešams uzglabāt ilgāku laiku, var glabāt 2–8℃ temperatūrā.
■ Lineārā akrilamīda šķīdumu var uzglabāt istabas temperatūrā 7 dienas;pēc komplekta saņemšanas, lūdzu, izņemiet to un uzglabājiet -20°C.
■ Pēc lineārā akrilamīda pievienošanas buferšķīdumam DRL to var uzglabāt 2–8°C temperatūrā līdz 48 stundām.Lūdzu, izmantojiet gatavo risinājumu.
Problēmu analīzes rokasgrāmata
Tālāk ir sniegta to problēmu analīze, kas var rasties, ekstrahējot vīrusu DNS/RNS, cerot, ka tās būs noderīgas jūsu eksperimentos.Turklāt, lai atrisinātu citas eksperimentālas vai tehniskas problēmas, izņemot darbības instrukcijas un problēmu analīzi, mums ir īpašs tehniskais atbalsts, kas jums palīdzēs.Ja jums ir kādas vajadzības, lūdzu, sazinieties ar mums: 028-83360257 vai e-pastu:
Tech@foregene.com.
Nav nukleīnskābju ekstrakcijas vai zems nukleīnskābju iznākums
Parasti ir daudz faktoru, kas ietekmē reģenerācijas efektivitāti, piemēram: parauga nukleīnskābju saturs, darbības metode, eluēšanas tilpums utt.
Bieži sastopamo cēloņu analīze:
1. Procedūras laikā tika veikta ledus vanna vai zemas temperatūras (4°C) centrifugēšana.
Ieteikums: Darbiniet istabas temperatūrā (15-25°C) visa procesa laikā, nelietojiet ledus vannu un zemas temperatūras centrifugēšanu.
2. Paraugs tika uzglabāts nepareizi vai paraugs tika uzglabāts pārāk ilgi.
Ieteikums: uzglabājiet paraugus -80°C temperatūrā un izvairieties no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas;mēģiniet izmantot tikko savāktos paraugus nukleīnskābju ekstrakcijai.
3. Nepietiekama parauga līze.
Ieteikums: lūdzu, pārliecinieties, ka paraugs un līzes darba šķīdums ir rūpīgi sajaukti un inkubēti istabas temperatūrā (15-25°C) 10 minūtes.
4. Nepareiza eluenta pievienošana.
Ieteikums: Pārliecinieties, ka RNase-Free ddH2O tiek pievienots pa pilienam attīrīšanas kolonnas membrānas vidū un nemetiet to uz attīrīšanas kolonnas gredzena.
5. Buferšķīdumam RW2 netika pievienots pareizais absolūtā etanola daudzums.
Ieteikums: lūdzu, ievērojiet norādījumus, pievienojiet pareizo absolūtā etanola daudzumu buferšķīdumam RW2 un labi samaisiet pirms komplekta lietošanas.
6. Nepiemērots parauga apjoms.
Ieteikums: uz katriem 500 µl bufera DRL tiek apstrādāti 200 µl parauga.Pārmērīga parauga apstrāde izraisīs zemāku nukleīnskābju ekstrakcijas iznākumu.
7. Nepiemērots eluēšanas tilpums vai nepilnīga eluēšana.
Ieteikums: Attīrīšanas kolonnas eluenta tilpums ir 30-50μl;ja eluēšanas efekts nav apmierinošs, ieteicams pagarināt laiku istabas temperatūrā pēc iepriekš uzkarsēta RNase-Free ddH2O pievienošanas, piemēram, 5-10 min.
8. Pēc mazgāšanas ar buferšķīdumu RW2 uz kolonnas paliek etanols.
Ieteikums: Ja pēc 2 minūšu centrifugēšanas ar buferšķīdumu RW2 paliek etanols, kolonnu pēc centrifugēšanas var novietot istabas temperatūrā uz 5 minūtēm, lai pilnībā noņemtu etanola atlikumu.
Attīrītā nukleīnskābe tiek noārdīta
Attīrītās nukleīnskābes kvalitāte ir saistīta ar parauga saglabāšanos, RNāzes piesārņojumu, darbību un citiem faktoriem.Bieži sastopamo cēloņu analīze:
1. Savāktie paraugi netika laikus uzglabāti.
Ieteikums: Ja paraugs netiek izmantots laikā pēc savākšanas, lūdzu, nekavējoties uzglabājiet to -80°C zemā temperatūrā.RNS ekstrakcijai mēģiniet izmantot tikko savāktos paraugus.
2. Savāc paraugus un atkārtoti sasaldē un atkausē.
Ieteikums: Izvairieties no sasaldēšanas un atkausēšanas (ne vairāk kā vienu reizi) paraugu savākšanas un uzglabāšanas laikā, pretējā gadījumā samazināsies nukleīnskābju iznākums.
3. Operāciju zālē tiek ievadīta RNāze vai netiek valkāti vienreizējie cimdi, maskas utt.
Ieteikums: RNS ekstrakcijas eksperimentus vislabāk veikt atsevišķā RNS operāciju telpā, un laboratorijas galds pirms eksperimenta ir jānotīra.
Eksperimenta laikā valkājiet vienreizējās lietošanas cimdus un maskas, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa RNāzes ievadīšana.
4. Lietošanas laikā reaģents bija piesārņots ar RNāzi.
Ieteikums: nomainiet ar jaunu vīrusu DNS/RNS izolācijas komplektu saistītiem eksperimentiem.
5. RNS manipulācijām izmantotās centrifūgas mēģenes un pipešu uzgaļi ir piesārņoti ar RNāzi.
Ieteikums: Pārliecinieties, vai RNS ekstrakcijai izmantotās centrifūgas mēģenes, pipešu uzgaļi, pipetes utt. ir bez RNāzes.
Attīrīta nukleīnskābe ietekmē pakārtotos eksperimentus
DNS un RNS, kas attīrīti ar attīrīšanas kolonnu, ja sāls jonu un olbaltumvielu saturs ir pārāk augsts, tas ietekmēs pakārtotos eksperimentus, piemēram: PCR amplifikācija, reversā transkripcija utt.
1. Eluētajā DNS un RNS ir atlikušie sāls joni.
Ieteikums: Pārliecinieties, vai buferšķīdumam RW2 ir pievienots pareizais absolūtā etanola daudzums, un divas reizes mazgājiet attīrīšanas kolonnu ar centrifugēšanas ātrumu, kas norādīts lietošanas instrukcijā;Veiciet centrifugēšanu, lai samazinātu sāls jonu piesārņojumu.
2. Eluētajā DNS un RNS ir etanola atliekas.
Ieteikums: Pēc mazgāšanas ar Buffer RW2 apstiprināšanas veiciet tukšas mēģenes centrifugēšanu ar centrifugēšanas ātrumu lietošanas instrukcijā;ja joprojām ir etanola atlikumi, varat centrifugēt tukšo mēģeni un pēc tam novietot to istabas temperatūrā uz 5 minūtēm, lai maksimāli noņemtu etanola atlikumus.
Lietošanas rokasgrāmatas:
Vīrusu DNS un RNS izolācijas komplekta lietošanas instrukcija
