Vīrusu RNS izolācijas komplekts vīrusu RNS attīrīšanai no plazmas, seruma un citiem paraugiem
Komplekta apraksts:
Kat.Nr.RE-02011/02014
Vīrusu RNS attīrīšanai no plazmas, seruma, bezšūnu ķermeņa šķidrumiem, šūnu kultūras supernatantiem.
Ātri izolējiet un attīriet vīrusu RNS no tādiem paraugiem kā plazma, serums, bezšūnu ķermeņa šķidrumi un šūnu kultūras supernatanti.
-Nav jāuztraucas par RNS degradāciju.Viss komplekts ir bez RNāzes
-Vienkārši — visas darbības tiek veiktas istabas temperatūrā
-Ātri — darbību var pabeigt 20 minūtēs
-Augsta RNS iznākums: tikai RNS kolonna un unikāla formula var efektīvi attīrīt RNS
-Drošs — netiek izmantots organiskais reaģents
-Liela paraugu apstrādes jauda — katru reizi var apstrādāt līdz 200μl paraugu.
-Augsta kvalitāte — attīrītā RNS ir ļoti tīra, bez olbaltumvielām un citiem piemaisījumiem, un tā var atbilst dažādiem pakārtotiem eksperimentāliem lietojumiem.
Apraksti
Komplektā tiek izmantota Foregene izstrādātā centrifūga un formula, kas var efektīvi iegūt augstas tīrības un augstas kvalitātes vīrusu RNS no tādiem paraugiem kā plazma, serums, ķermeņa šķidrums bez šūnām un šūnu kultūras supernatanta.Komplektā ir īpaši pievienots lineārais akrilamīds, kas var viegli uztvert nelielu daudzumu RNS no paraugiem.Tikai RNS kolonna var efektīvi saistīt RNS.Komplekts vienlaikus var apstrādāt lielu skaitu paraugu.
Viss komplekts nesatur RNāzi, tāpēc attīrītā RNS netiks noārdīta.Buferis viRW1 un buferis viRW2 var nodrošināt, ka iegūtā vīrusa nukleīnskābe nesatur proteīnu, nukleāzi vai citus piemaisījumus, ko var tieši izmantot pakārtotajiem molekulārās bioloģijas eksperimentiem.
Specifikācijas
50 sagatavošanās, 200 sagatavošanās
Komplekta sastāvdaļas
| Lineārais akrilamīds |
| Buferis viRL |
| Buferis viRW1, buferis viRW2 |
| RNāzes nesaturošs ddH2O |
| Tikai RNS kolonna |
| Instrukcijas |
Īpašības un priekšrocības
-Nav jāuztraucas par RNS degradāciju.Viss komplekts ir bez RNāzes
-Vienkārši — visas darbības tiek veiktas istabas temperatūrā
-Ātri — darbību var pabeigt 20 minūtēs
-Augsta RNS iznākums: tikai RNS kolonna un unikāla formula var efektīvi attīrīt RNS
-Drošs — netiek izmantots organiskais reaģents
-Liela paraugu apstrādes jauda — katru reizi var apstrādāt līdz 200μl paraugu.
-Augsta kvalitāte — attīrītā RNS ir ļoti tīra, bez olbaltumvielām un citiem piemaisījumiem, un tā var atbilst dažādiem pakārtotiem eksperimentāliem lietojumiem.
Komplekta parametri
Komplekta pielietojums:
Tas ir piemērots vīrusu RNS ekstrakcijai un attīrīšanai tādos paraugos kā plazma, serums, bezšūnu ķermeņa šķidrums un šūnu kultūras supernatants.
Darba plūsma
Uzglabāšanas apstākļi
- Komplektu var uzglabāt 24 mēnešus istabas temperatūrā (15-25 ℃) vai 2-8 ℃ ilgāk.
-Lineārā akrilamīda šķīdumu var uzglabāt istabas temperatūrā 7 dienas.Pēc komplekta saņemšanas, lūdzu, izņemiet Linear Acrylamide šķīdumu un uzglabājiet to -20 ℃.
-Pēc lineārā akrilamīda pievienošanas Buffer viRL to var uzglabāt 2-8 ℃ temperatūrā līdz 48 stundām.Lūdzu, izmantojiet svaigi pagatavotu šķīdumu.
Rokasgrāmatas problēmu analīzei
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
RNS nevar ekstrahēt vai nukleīnskābes iznākums ir zems
Parasti ir daudzi faktori, kas ietekmē reģenerācijas efektivitāti, piemēram: parauga RNS saturs, darbības metode, eluēšanas tilpums utt.
Bieži sastopamo cēloņu analīze:
1. Ledus vanna vai zemas temperatūras (4 °C) centrifugēšana darbības laikā.
Ieteikums: Darbība istabas temperatūrā (15-25 °C), nekad ledus vannā un zemas temperatūras centrifūgā.
2. Nepareiza paraugu uzglabāšana vai pārāk ilga paraugu uzglabāšana.
Ieteikums: Uzglabājiet paraugus -80 ° C temperatūrā vai sasaldējiet šķidrā slāpeklī un izvairieties no atkārtotas sasaldēšanas-atkausēšanas;mēģiniet RNS ekstrakcijai izmantot tikko savāktos paraugus.
3.Nepietiekama parauga līze
Ieteikums: lūdzu, pārliecinieties, ka paraugs un darba šķīdums (Lineārais akrilamīds) ir rūpīgi sajaukti un inkubēti 10 minūtes istabas temperatūrā (15-25 °C).
4.Eluents tika pievienots nepareizi
Ieteikums: pārliecinieties, ka attīrīšanas kolonnas membrānas vidū ir pievienots RNase-Free ddH2O.
5. Nepareizs bezūdens etanola daudzums buferšķīdumā viRW2
Ieteikums: lūdzu, izpildiet norādījumus, pievienojiet pareizo daudzumu bezūdens etanola buferšķīdumam viRW2 un kārtīgi samaisiet pirms komplekta lietošanas.
6. Nepareiza parauga izmantošana.
Ieteikums: 200 µl parauga uz 500 µl bufera viRL.Pārmērīga parauga tilpuma dēļ samazināsies RNS ekstrakcijas ātrums.
7.Nepareizs eluēšanas tilpums vai nepilnīga eluēšana.
Ieteikums: Attīrīšanas kolonnas eluenta tilpums ir 30-50μl;ja eluēšanas efekts nav apmierinošs, ieteicams pievienot iepriekš uzkarsētu RNase-Free ddH2O un pagariniet laiku, novietojot istabas temperatūrā, piemēram, 5-10 min
8. Attīrīšanas kolonnā ir etanola atlikumi pēc skalošanas buferšķīdumā viRW2.
Ieteikums: Ja pēc skalošanas buferšķīdumā viRW2 un tukšas mēģenes centrifugēšanas 2 minūtes joprojām paliek etanols, attīrīšanas kolonnu pēc centrifugēšanas tukšā mēģenē var atstāt istabas temperatūrā 5 minūtes, lai pilnībā noņemtu atlikušo etanolu.
Attīrītu RNS molekulu degradācija
Attīrītās RNS kvalitāte ir saistīta ar tādiem faktoriem kā paraugu uzglabāšana, RNāzes piesārņojums un darbība.
Bieži sastopamo cēloņu analīze:
1.Ievāktie paraugi netika savlaicīgi saglabāti.
Ieteikums: Ja paraugs netiek izmantots laikā pēc savākšanas, lūdzu, nekavējoties uzglabājiet to -80 ℃ vai šķidrā slāpeklī.RNS molekulu ekstrakcijai, kad vien iespējams, mēģiniet izmantot tikko savāktus paraugus.
2. Savāktie paraugi tika atkārtoti sasaldēti un atkausēti.
Ieteikums: Izvairieties no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas (ne vairāk kā vienu reizi) paraugu savākšanas un uzglabāšanas laikā, pretējā gadījumā samazināsies nukleīnskābes iznākums.
3. Operāciju zālē tika ieviesta RNāze vai netika valkāti vienreizējie cimdi, maskas utt.
Ieteikums: RNS molekulu ekstrakcijas eksperimentu vislabāk veikt atsevišķā RNS operāciju telpā, un eksperimentālo galdu pirms eksperimenta notīra.Eksperimenta laikā valkājiet vienreizējās lietošanas cimdus un maskas, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa RNāzes ievadīšana.
4. Lietošanas laikā reaģents ir piesārņots ar RNāzi.
Ieteikums: nomainiet ar jaunu vīrusu RNS izolācijas komplektu saistītiem eksperimentiem.
5. RNāzes piesārņojums centrifūgas caurulēs, pipešu uzgaļos utt. Ieteikums: Pārliecinieties, vai centrifūgas mēģenes, pipetes uzgaļi un pipetes nesatur RNāzes.
Attīrītās RNS molekulas ietekmēja pakārtotos eksperimentus
RNS molekulas, kas attīrītas ar attīrīšanas kolonnu, ietekmēs pakārtotos eksperimentus, ja ir pārāk daudz sāls jonu vai proteīnu, piemēram: reversā transkripcija, Northern Blot utt.
1.Eluētajās RNS molekulās ir atlikušie sāls joni.
Ieteikums: Pārliecinieties, vai buferšķīdumam viRW2 ir pievienots pareizais bezūdens etanola daudzums, un divreiz mazgājiet attīrīšanas kolonnu atbilstoši pareizajam centrifugēšanas ātrumam, kas norādīts lietošanas instrukcijā. Ja vēl ir atlikuši sāls joni, varat pievienot attīrīšanas kolonnai Buffer viRW2 un atstāt to istabas temperatūrā 5 minūtes.Pēc tam veiciet centrifugēšanu, lai maksimāli noņemtu sāls jonu piesārņojumu
2. Eluētajās RNS molekulās ir atlikušais etanols
Ieteikums: kad esat pārliecināts, ka attīrīšanas kolonnas ir izskalotas ar buferšķīdumu viRW2, veiciet centrifugēšanu tukšā caurulē atbilstoši centrbēdzes ātrumam, kas norādīts lietošanas instrukcijā.Ja vēl ir palicis etanols, pēc centrifugēšanas tukšā mēģenē to var atstāt uz 5 minūtēm istabas temperatūrā, lai maksimāli noņemtu atlikušo etanolu.
Lietošanas rokasgrāmatas:
Vīrusu RNS izolācijas komplekta lietošanas instrukcija
