Vai jūs joprojām izmantojat Trizol, lai iegūtu RNS?
Dievs, neļauj man uztraukties par tavu veselību!
Trizols drīz tiks atstumts, nesaki man, ka joprojām esi tumsā?

Trizol reaģenta galvenā sastāvdaļa ir fenols, un eksperimentālajā darbībā tiek pievienoti arī organiskie reaģenti, piemēram, hloroforms.Ilgstoša iedarbība nodarīs kaitējumu jūsu veselībai, jo īpaši tieša saskare ar ādu var izraisīt smagus ķīmiskus apdegumus un paliekošas rētas.

Normālos apstākļos laboratorijas partneri var samazināt riskus, tikai pilnībā bruņojoties (valkājot laboratorijas mēteļus, cimdus un maskas).

Un mans padoms jums ir: lūdzu, nomainiet Trizol tieši, lai izvairītos no kaitējuma no avota.

1. Pirmās paaudzes RNS ekstrakcijas produkts
Iznāca 1987. gadā (Trizol reaģenti)

priekšrocība:
Pilnīgāka ekstrakcija

Trūkumi:
Nepieciešami toksiski reaģenti, piemēram, guanidīna izotiocianāts-fenols-hloroforms;
Apgrūtinoša darbība;
Lai noņemtu DNS piesārņojumu, jāizmanto DNāze

2.RNS ekstrakcijas otrās paaudzes produkts
Iznāca 1994. gadā (QIAGEN RNeasy un lielākā daļa vietējo produktu)

priekšrocība:
Tiek pieņemta kolonnas centrbēdzes metode, kas ir viegli lietojama;

Trūkums:
Nepieciešams centrifugēt, lai noņemtu audu atliekas
Lai noņemtu DNS piesārņojumu, jāizmanto DNāze

3.Trešās paaudzes RNS ekstrakcijas produkts
Iznāks 2005. gadā (QIAGEN RNeasy Plus un ForegēnsRNS attīrīšanas sērijas produkti)

priekšrocība:
Izmantojiet tieši DNS noņemšanas kolonnu, lai vienlaikus noņemtu DNS un audu atliekas, ietaupot laiku un pūles;
Drošs un ērts, nav nepieciešams pievienot filtra kolonnu un DNāzi, lai viegli noņemtu piemaisījumus un izvairītos no DNS piesārņojuma

Apskatīsim darbības atšķirības starp RNS ekstrakcijas pirmās paaudzes produktu (Trizol), otrās paaudzes produktu (RNeasy) un trešās paaudzes produktu (Foregene):

Darbība attēlā ir skaidra: trešās paaudzes produktam ir acīmredzamas priekšrocības

Tikai trīs vārdi, lai aprakstītu: viegli!Ātri!Drošība

Eksperimentālo rezultātu PK diagrammapriekšpirmās, otrās paaudzes un trešās paaudzes RNS ekstrakcijas produkti:

1. Eelektroforetogramma

Pirmā paaudze (1: Trizol)
Otrā paaudze (2: QIAGEN RNeasy)
Trešā paaudze (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Kāds produkts ir labs, jūs uzzināsit, salīdzinot
RNS ekstrahēta, izmantojot Foregene komplektu
Ne tikai augsta koncentrācija, bet arī laba integritāte

2.qPCR diagramma (amplifikācijas līknes diagramma)

Pirmā paaudze (Trizol)

Otrā paaudze (debesu zilanozīmēQIAGEN RNeasy-, sarkansnozīmēQIAGEN RNeasy +)

Trešā paaudze (zils nozīmē Foregene, zaļš nozīmē QIAGEN RNeasy plus)

(Piezīme: qPCR otrās paaudzes QIAGEN RNeasy grafiks nozīmē, ka komplekts nepievieno DNāzi un nenoņem DNS piesārņojumu. Tāpēc CT ir augstāks un rezultāts nav precīzs; QIAGEN RNeasy + nozīmē, ka ir pievienota DNāze un DNS piesārņojums ir noņemts, un rezultāts ir precīzs)

Neatkarīgi no tā, vai tā ir elektroforetogramma vai kvantitatīvās PCR pastiprināšanas līknes grafiks, Foregene produktu kvalitāte nav zemāka par ārvalstu importētajiem produktiem.