Ievads:

RNS molekulas var plaši mijiedarboties ar citām bioloģiskām molekulām, piemēram, olbaltumvielām, DNS un RNS, un tādējādi pastāvēt šūnās un organismos makromolekulāru kompleksu veidā.Starp tiem RNS-olbaltumvielu kompleksi ir RNS esamība un funkcija Viena no svarīgākajām formām.RNS nolaišana ir klasiska metode RNS molekulu skrīningam un identificēšanai, jo īpaši lncRNS molekulu mijiedarbības proteīniem, un to atzīst lielākā daļa pētnieku un starptautisku autoritatīvu akadēmisko žurnālu.Šodien FORREGENE dalīsies ar jums ar RNS izvilkšanas eksperimentālo principu un tehnisko procesu, varbūt jūs to varat izmantot

1. RNS nolaišanas tehnoloģijas eksperimentālais princips:

Ar biotīnu iezīmētu mērķa lncRNS vai lncRNS fragmentu in vitro transkripcija un sintēze (tostarp RNS fragmenti, ko izmanto kā pozitīvās un negatīvās kontroles), un inkubācija ar šūnu ekstraktiem;RNS-proteīna vai RNS-RNS kompleksu savākšanai izmantojiet ar avidīnu piestiprinātas magnētiskās lodītes. Pēc rūpīgas mazgāšanas komplekss tiek eluēts.Ja tiek noteikta proteīna mērķa molekula, kas mijiedarbojas ar lncRNS, veiciet proteīna elektroforēzi RNS noņemamajam produktam, nosakiet mērķa proteīnu ar sudraba krāsošanu un izgrieziet želeju masas spektrometrijai;arī tieši veikt Western blot pārbaudi nolaižamajam produktam;ja tiek konstatēts RNS mērķa molekulām, kas mijiedarbojas ar lncRNS, RNS-pull down produkti tiek pakļauti RNS ekstrakcijai un tiek veikta specifiska qRT-PCR noteikšana.

2. RNS lejupielādes tehnoloģijas eksperimenta process:

3. FOREGENE RNS noņemšanas tehniskais dienests:

Šūnu kultūra

Šūnu kopējā/kodolproteīna/plazmas proteīna ekstrakta sagatavošana

RNS nolaišanas eksperiments

SDS-PAGE elektroforēze, sudraba traips

Masu spektrometrijas un WB eksperimenti

Eksperimentāls ziņojums

4. Eksperimentāls gadījums

Nākamajā attēlā parādīti FJ Bio-Bio RNS nolaišanas un SDS-PAGE elektroforēzes noteikšanas rezultāti, kuros sarkanā bultiņa apzīmē atšķirības joslu:

Sičuaņas universitātes profesora Song Xu pētniecības grupa ir uzkrājusi 15 gadus ilgu ilgtermiņa uzkrāšanos lncRNS pētījumu jomā.Foregene Bio un profesora Song Xu pētniecības grupa sadarbojās, lai ieviestu lncRNA RNS nolaišanas tehnoloģiju, kas sniegs jums apmierinošu eksperimenta rezultātu.