Animal Tissue Direct PCR komplekts-UNG (bez paraugu ņemšanas rīkiem) protokols
Apraksti
Šis komplekts izmanto unikālu līzes bufera sistēmu, lai ātri atbrīvotu genoma DNS no dzīvnieku audu paraugiem PCR reakcijām, tāpēc tas ir īpaši piemērots liela mēroga ģenētiskai pārbaudei.
Genomiskās DNS atbrīvošanas process no līzes bufera tiek pabeigts 10–30 minūšu laikā 65 °C temperatūrā.Nav nepieciešami citi procesi, piemēram, olbaltumvielu un RNS noņemšana, un atbrīvoto DNS pēdu var izmantot kā PCR reakcijas veidni.
2 × PCR EasyTMMix (UNG) izmanto dUTP, nevis dTTP, pamatojoties uz 2×PCR EasyTMSajauc un pievieno UNG enzīmu (Uracil-N-glikozilāzi), kas vienlaikus var noārdīt veidni, kas satur dUTP.Pirms PCR reakcijas UNG fermentu izmanto, lai noārdītu uracilu saturošo PCR produktu.UNG enzīms neietekmēs veidni, kas nesatur uracilu, tādējādi nodrošinot amplifikācijas specifiskumu un precizitāti un novēršot PCR produktu piesārņojuma iespēju liela mēroga ģenētiskās pārbaudes laikā.
D-Taq DNS polimerāze ir DNS polimerāze, ko Foregene īpaši izstrādājusi tiešajām PCR reakcijām.D-Taq DNS polimerāzei ir spēcīga tolerance pret dažādiem PCR reakcijas inhibitoriem, un tā var efektīvi pastiprināt nelielu daudzumu DNS dažādās sarežģītās reakciju sistēmās, un amplifikācijas ātrums var sasniegt 2Kb/min, kas ir īpaši piemērots tiešai PCR reakcijai.
Komplekta sastāvdaļas
I daļa | Buferis AL |
Foregēna proteāze | |
6 × DNS ielādes buferis | |
II daļa | 2 × PCR EasyTMMix (UNG) |
Īpašības un priekšrocības
■Nav laikietilpīgas un dārgas DNS attīrīšanas
■ Paraugu pieprasījums ir neliels, var pārbaudīt tikai 5 mg dzīvnieku audu.
■ Nav nepieciešama īpaša apstrāde, piemēram, slīpēšana un drupināšana, un darbība ir vienkārša.
■ Optimizētā PCR sistēma nodrošina PCR augstāku specifiskumu un spēcīgāku toleranci pret PCR reakcijas inhibitoriem.
■ Pretpiesārņojuma PCR sistēma 2×Viegli PCRTMMix (UNG) efektīvi novērš PCR produktu radīto piesārņojumu un nodrošina pastiprināšanas specifiku un precizitāti.
Komplekta parametri
Pielietojums: dažādi dzīvnieku audi.
DNS, kas atbrīvota no parauga līzes: izmanto tikai kā PCR veidni.
Komplektu var izmantot šādiem mērķiem: transgenozes identificēšanai, dzīvnieku genotipa noteikšanai utt.
Darba plūsma
Uzglabāšana un glabāšanas laiks
Šī komplekta I daļa jāuzglabā 2-8℃.
Reaģentu Buffer AL var uzglabāt 12 mēnešus sausos apstākļos;to var uzglabāt 2-8℃ilgākai uzglabāšanai.
Reaģentam Foregene Protease ir unikāla formula.Lai nodrošinātu tā darbību un stabilitāti, lūdzu, uzglabājiet to 4℃uz 12 mēnešiem.
Reaģents 6×DNS ielādes buferi var uzglabāt 4℃vai -20℃ilgu laiku.
Šī komplekta II daļa jāuzglabā temperatūrā -20℃.
2. reaģents×Viegli PCRTMMix (UNG), ja to lieto bieži, to var uzglabāt arī 4℃īslaicīgai uzglabāšanai (izlietot 10 dienu laikā).