Mēs vienmēr domājam un praktizējam atbilstoši apstākļu maiņai un augam.Mūsu mērķis ir iegūt bagātāku prātu un ķermeni, kā arī iztiku profesionālu magnētisko vīrusu RNS nukleīnskābju izolācijas attīrīšanas fasēto komplektu vairumtirgotājiem. Mūsu firma veic procedūras principu “uz integritāti balstīta, uz sadarbību balstīta, uz cilvēkiem orientēta, abpusēji izdevīga sadarbība”.Mēs ceram, ka mums būs viegli izveidot patīkamas partnerattiecības ar uzņēmējiem no visas vides.
Mēs vienmēr domājam un praktizējam atbilstoši apstākļu maiņai un augam.Mūsu mērķis ir iegūt bagātāku prātu un ķermeni, kā arī dzīvošanuĶīnas universālie RNS DNS reaģenti un automātiskā nukleīnskābju attīrīšana, Mēs cenšamies apmierināt mūsu klientu prasības visā pasaulē.Mūsu preču un pakalpojumu klāsts nepārtraukti paplašinās, lai apmierinātu klientu prasības.Laipni lūdzam jaunus un vecus klientus no visām dzīves jomām, lai sazinātos ar mums turpmākām biznesa attiecībām un savstarpēju panākumu gūšanai!
Lietošanas rokasgrāmatas:

 Mēs vienmēr domājam un praktizējam atbilstoši apstākļu maiņai un augam.Mūsu mērķis ir iegūt bagātāku prātu un ķermeni, kā arī iztiku profesionālu magnētisko vīrusu RNS nukleīnskābju izolācijas attīrīšanas fasēto komplektu vairumtirgotājiem. Mūsu firma veic procedūras principu “uz integritāti balstīta, uz sadarbību balstīta, uz cilvēkiem orientēta, abpusēji izdevīga sadarbība”.Mēs ceram, ka mums būs viegli izveidot patīkamas partnerattiecības ar uzņēmējiem no visas vides.
Vairumtirdzniecības dīleriĶīnas universālie RNS DNS reaģenti un automātiskā nukleīnskābju attīrīšana, Mēs cenšamies apmierināt mūsu klientu prasības visā pasaulē.Mūsu preču un pakalpojumu klāsts nepārtraukti paplašinās, lai apmierinātu klientu prasības.Laipni lūdzam jaunus un vecus klientus no visām dzīves jomām, lai sazinātos ar mums turpmākām biznesa attiecībām un savstarpēju panākumu gūšanai!

Problēmu analīzes rokasgrāmata

Tālāk ir sniegta to problēmu analīze, ar kurām jūs varat saskartiesAugu kopāRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

Centrifugēšanas kolonna ir aizsērējusi

Centrifugēšanas kolonnas bloķēšana izraisīs RNS iznākuma samazināšanos vai pat to nevarēs attīrīt, lai iegūtu RNS, un iegūtās RNS kvalitāte būs zema.

Bieži sastopamo cēloņu analīze:

1. Paraugs nav pilnībā salauzts.

Nepilnīga parauga fragmentācija var bloķēt DNS tīrīšanas kolonnu, kas var ietekmēt arī RNS iznākumu un kvalitāti.Mēs iesakām, veicot paraugu sadrumstalotību, ātri samalt pietiekamā daudzumā šķidrā slāpekļa, lai pēc iespējas vairāk sadalītu paraugu audus, piemēram, šūnu sienas un šūnu membrānas.Polifenola polisaharīdu augu paraugiem mēs iesakām izmantot Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2.Aspirējiet DNS tīrīšanas kolonnas izolēto supernatantu, aspirējiet iespējamo šūnu atlieku granulu.

Aspirēta šūnu atlieku granula var aizsprostot tikai RNS kolonnu RNS adsorbcijas procedūru laikā (skatiet procedūras 5. darbību, polisaharīda polifenola procedūras 6. darbību).Mēs iesakām ievērot piesardzību, aspirējot šo supernatantu, lai izvairītos no šūnu atlieku aspirācijas.

3. Sākotnējais parauga daudzums ir pārāk liels.

Pārmērīga parauga izmantošana izraisīs nepilnīgu parauga sadrumstalotību vai nepilnīgu šūnu līzi, izmantojot buferi PRL1 vai buferi PSL1, kā rezultātā attīrīšanas operācijām tiks aizsērējusi attīrīšanas kolonna.Augu kopējās RNS izolācijas komplekta sākotnējais maksimālais daudzums ir 50 mg vienā operētā parauga attīrīšanā.Polifenola polisaharīdu augu paraugiem iesakām izmēģināt Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

4. Centrifūgas temperatūra ir pārāk zema.

Visa RNS izolēšana un attīrīšana, izņemot parauga audu izjaukšanu ar šķidro slāpekli, visas darbības veic istabas temperatūrā (20-25 °C).Dažām zemas temperatūras centrifūgām temperatūra ir zemāka par 20 °C, kas var izraisīt aizsprostojumus DNS tīrīšanas kolonnā un/vai kolonnā, kas satur tikai RNS.Ja tā notiek, iestatiet centrifūgas temperatūru uz 20–25 °C un iepriekš sasildiet līzes maisījumu un/vai etanola atdalīšanas supernatantu līdz 37 °C.

RNS netiek ekstrahēts vai RNS iznākums ir zems

Parasti ir daudz faktoru, kas ietekmē reģenerācijas efektivitāti, piemēram: parauga RNS saturs, darbības metode, eluēšanas tilpums utt.

Biežāko cēloņu analīze, kā norādīts tālāk:

1.Operācijas laikā tika veikta ledus vanna vai zemas temperatūras (4°C) centrifugēšana.

Ieteikums: Darbināt istabas temperatūrā (15-25°C) visā procesā, neveikt ledus vannu un zemas temperatūras centrifugēšanu.

       2.RNS ir degradēta nepareizas parauga saglabāšanas vai ilgstošas ​​parauga saglabāšanas dēļ.

Ieteikums: Svaigi savāktos paraugus ātri jāsasaldē šķidrā slāpeklī un pēc tam ilgstoši jāuzglabā -80°C, jāizvairās no atkārtotas paraugu sasaldēšanas un atkausēšanas;vai nekavējoties iemērc paraugus RNS stabilizatora RNAlater šķīdumā (dzīvnieku paraugi).

       3.Nepietiekama parauga sadrumstalotība un līze noved pie attīrīšanas kolonnas bloķēšanas.

Ieteikums: Sasmalcinot salveti, lūdzu, pārliecinieties, vai audi ir pietiekami samalti, un ātri pārnesiet to uz iepriekš sagatavotu buferšķīdumu PSL1 (apstipriniet, ka ir pievienota pareizā β-ME proporcija, skatiet procedūras 1. darbību).

4.Eluents tika pievienots nepareizi.

Ieteikums: pārliecinieties, vai RNase-Free ddH₂O tiek pilināts attīrīšanas kolonnas membrānas vidū.

5. Buferim PSL2 vai buferim PRW2 netika pievienots pareizais absolūtā etanola daudzums.

Ieteikums: lūdzu, ievērojiet norādījumus, pievienojiet pareizo absolūtā etanola daudzumu buferšķīdumam PSL2 un buferšķīdumam PRW2 un labi samaisiet pirms komplekta lietošanas.

6.Audu parauga daudzums nav piemērots.

Ieteikums: izmantojiet 50 mg audu uz 500 μl buferšķīduma PSL1.Lietojot pārāk daudz audu, samazināsies iegūtās RNS daudzums, kā arī samazināsies iegūtās RNS tīrība.Mēs stingri iesakām, ka sākotnējā parauga deva nedrīkst pārsniegt 50 mg vienā RNS ekstrakcijas operācijā.

7. Nepiemērots eluēšanas tilpums vai nepilnīga eluēšana.

Ieteikums: Attīrīšanas kolonnas eluenta tilpums ir 50-200 μl;ja eluēšanas efekts nav apmierinošs, ieteicams pagarināt laiku istabas temperatūrā pēc iepriekš uzkarsēta RNase-Free ddH pievienošanas.₂O, piemēram, 5-10 min.

8. Attīrīšanas kolonnā ir etanola atlikumi pēc mazgāšanas ar buferšķīdumu PRW2.

   Ieteikums: ja tukšo mēģeni centrifugē 1 minūti un pēc mazgāšanas buferšķīdumā PRW2 joprojām ir palicis etanols, varat palielināt tukšās mēģenes centrifugēšanas laiku līdz 2 minūtēm vai novietot attīrīšanas kolonnu istabas temperatūrā uz 5 minūtēm, lai pilnībā noņemtu atlikušo etanolu.

9. Komplekts tika izmantots nepareizi.

   Ieteikums: polifenola polisaharīdu augu paraugiem, izmantojot tādus izplatītus komplektus kā Plant Total RNA Isolation Kit, iespējams, nevarēs iegūt ideālus RNS paraugus.Mēs iesakām izmantot Plant Total RNA IsolationKit Plus, kas ir īpaši izstrādāts polifenola polisaharīdu augu paraugiem.Komplekts, kas īpaši izstrādāts RNS ekstrakcijai no polifenola un polisaharīdu augu paraugiem.

OD260/OD280 vērtība ir zema

RNS eluēšana ar ddH₂O un izmantots spektrofotometra rādījumiem, rada zemas OD260/OD280 vērtības.Mēs iesakām izmantot 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (nevis RNase-Free ddH₂O, lai eluētu RNS), lai iegūtu salīdzinoši pareizas OD260/OD280 vērtības, skatiet “RNS koncentrācijas un attīrīšanas testi” 19. lpp.

Attīrītā RNS tiek noārdīta

Attīrītas RNS kvalitāte ir saistīta ar tādiem faktoriem kā parauga saglabāšana, RNāzes piesārņojums un manipulācijas.

Bieži sastopamo cēloņu analīze:

1.Audu paraugi pēc savākšanas netika laikus uzglabāti.

    Ieteikums: Ja audu paraugus pēc savākšanas neizmanto laikus, lūdzu, nekavējoties uzglabājiet tos šķidrā slāpeklī zemā temperatūrā vai pārnesiet uz -80°C ilgstošai uzglabāšanai pēc ātras sasaldēšanas šķidrā slāpeklī, vai nekavējoties iegremdējiet paraugus RNS stabilizatora RNAlater šķīdumā (dzīvnieku paraugi).RNS ekstrakcijai mēģiniet izmantot svaigi savāktus audu paraugus.

2.Audu paraugu atkārtota sasaldēšana un atkausēšana.

   Ieteikums: Uzglabājot audu paraugus, vislabāk tos sagriezt nelielos gabaliņos konservēšanai un daļu no tiem izņemt, lietojot tos, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa atkārtota paraugu sasaldēšana un atkausēšana.

3.RNase tiek ieviesta operāciju zālē vai nav valkāti vienreizējie cimdi, maskas utt.

   Ieteikums: RNS ekstrakcijas eksperimentus vislabāk veikt atsevišķās RNS operācijās, un laboratorijas galds pirms eksperimenta ir jānotīra, kā arī eksperimenta laikā jāvalkā vienreizējās lietošanas cimdi un maskas, lai izvairītos no RNS degradācijas, ko izraisa RNāzes ievadīšana vislielākajā mērā.

4. Lietošanas laikā reaģents ir piesārņots ar RNāzi.

   Ieteikums: nomainiet ar jaunu augu kopējās RNS ekstrakcijas komplektu sēriju saistītiem eksperimentiem.

5. Centrifūgas mēģenes un pipetes uzgaļi, ko izmanto RNS manipulācijām, ir piesārņoti ar RNāzi.

Ieteikums: Pārliecinieties, vai RNS ekstrakcijā izmantotās centrifūgas mēģenes, pipešu uzgaļi, pipetes utt. ir bez RNāzes.

Lietošanas rokasgrāmatas:

Augu kopējās RNS izolācijas komplekta lietošanas instrukcija