EndoFree Maxi plazmīdu komplekts (griešanās kolonna)
Apraksts
EndoFree Maxi Plasmid Kit izmanto unikālu silīcija dioksīda membrānas adsorbcijas paņēmienu, lai efektīvi un specifiski saistītu plazmīdu DNS.Apvienojot īpašo endotoksīnu noņemšanas buferi P4 un EndoFree Maxi filtrēšanas kolonnas, var efektīvi noņemt endotoksīnu, olbaltumvielas un citus piemaisījumus.Viss ekstrakcijas process aizņem tikai 1 stundu, nodrošinot ērtu un ātru darbību.
Ieteicamais baktēriju daudzums katrai praksei: augstas kopijas plazmīdai ieteicams izmantot 100 ml baktēriju barotnes, un iznākums no tās parasti ir aptuveni 500–1500 μg.Plazmīdai ar zemu kopiju ieteicams 200 ml baktēriju barotnes, lai radītu aptuveni 200–600 μg plazmīdu.
Komplekta sastāvdaļas
Produkts Sastāvdaļas | D909-E(10 sagatavošanās darbi) |
Buferis BL | 30 ml |
Buferis P1 | 100 ml |
Buferis P2 | 100 ml |
Buferis P4 | 100 ml |
Buferis DW2 | 44 ml |
Buferis EB | 30 ml |
RNāze A (10 mg/ml) | 1 ml |
DNAPure Maxi Spin Columns | 10 gab |
Filtra šļirce FinePure Maxi | 10 gab |
50 ml savākšanas tūbiņas | 10 gab |
Plazmīdu DNS koncentrācijas un tīrības noteikšana
Ekstrahētās plazmīdas DNS tīrību un koncentrāciju var noteikt ar agarozes gēla elektroforēzi un ultravioleto spektrofotometru.OD260 vērtība 1 atbilst aptuveni 50 μg/ml divpavedienu DNS.Attīrītas plazmīdas DNS OD260/OD280 vērtība parasti ir diapazonā no 1,7 līdz 1,9.Attīrīto plazmīdas DNS var tieši izmantot eksperimentos ar augstām tīrības prasībām, piemēram, šūnu transfekcijai vai in vivo eksperimentiem.
Komplekta pielietojums
Plazmīdas DNS, kas iegūta ar šo komplektu, var izmantot dažādām ikdienas darbībām, ieskaitot fermentatīvo šķelšanu, PCR, sekvencēšanu, ligēšanu, transformāciju, kā arī dažādu šūnu tipu transfekciju.
Uzglabāšana un glabāšanas laiks
EndoFree Maxi Plasmid Kit var uzglabāt istabas temperatūrā (15-25°C) sausos apstākļos līdz 12 mēnešiem.Pirms pirmās lietošanas pievienojiet RNāzi A buferšķīdumam P1, labi samaisiet un uzglabājiet 2–8 °C temperatūrā.Maisījumu var stabili uzglabāt ilgāk par 6 mēnešiem.