Tiešais RT-qPCR komplekts
Komplekta apraksts:
◮ Tiešais RT-qPCR komplekts, izmantojot Foreasy Reverse Transcriptase un Foreasy HS Taq DNS polimerāzi, ko izstrādā Foregene, ar unikālu reakcijas buferi, padara šo komplektu ar spēcīgu pretestību un savietojamību, un tas var tieši pārbaudīt reakciju, izmantojot Foregene Lysis sistēmu kā veidni.Šo komplektu var izmantot COVID-19 nukleīnskābju noteikšanas komplekta un citu patogēno baktēriju nukleīnskābju noteikšanas komplekta izstrādei.
Apraksts
Tiešais RT-qPCR komplekts nodrošina atsevišķi iepakotu RT-qPCR buferi un augstas efektivitātes fermentumaisījums (Taq、M-MLV、RI) ， padarot to ērtu aizmugures komplektu un sistēmu izveidošanairegulēšana ， vienkāršas pārbaudes laikā.
Specifikācijas
500T, 50 000T
Komplekta sastāvdaļas
| Komplekta saturs (20 μL reakcijas sistēma) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 t | |
| Tiešais enzīmu maisījums | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direct RT-qPCR buferis | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Instrukcija | 1 | 1 |
Darbības soļi
Pirms reaģenta sagatavošanas visi komplektā esošie reaģenti jāatkausē istabas temperatūrā un uzmanīgi jāsamaisa.
A: Sagatavot of veidne un reaģents
1. Sagatavojiet sagatavotu RNS veidni (RNS šablona ekstrakcijai un attīrīšanai ieteicams izmantot Foregene Total RNA Isolation Kit sērijas komplektu) vai parauga krekinga produktu (Ieteicams izmantot Foregene Lysis sistēmu), specifiskus primerus (10 μM) un citus atbilstošus palīgmateriālus, instrumentu.
2. Ievietojiet 2 x Direct RT-qPCR buferi, RNāzes nesaturošu ddH2O un 20 x ROX atsauces krāsu (ja's nepieciešams) kastē ar ledu, liekot tiem dabiski izkust un viegli samaisīt.
B: Sagatavot of RT-qPCR sistēma
Tabula 1 : Sagatavot of RT-qPCR ssistēma
| Komponents | Skaļums | Galīgā koncentrācija |
| 2× Direct RT-qPCR buferis | 10 μL | 1× |
| Tiešais enzīmu maisījums | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Reversais gruntējums (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Zonde (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Veidne (RNS vai lizāts) | X μL | |
| 20×ROX references krāsa | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Kopējais apjoms | 20μL |
C: Iestatīt uz RT-qPCR reakcija programma
Tabula 2 : RT-qPCR reaģēton programma iestatījumu (priekš piemērs: divi-solis metodi)
| Solis | Temperatūra | Laiks | Cikli | Saturs | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Reversā transkripcija |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Iepriekšēja denaturācija | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturācija | |
| 60℃ | 30 s 2* | Atlaidināšana / pagarināšana | |||
Uzglabāšana un glabāšanas laiks
-Komplekts jāuzglabā -20± 5℃.Derīguma termiņš ir 12 mēneši.
-Izvairieties no atkārtotiem sasaldēšanas-atkausēšanas cikliem (<5 cikli).
